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 GRADIENTE PERCOLL |
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PREPARACIÓN DEL GRADIENTE PERCOLL
- Con la jeringa de 3 ml, aspirar 1 ml del diluidor e inyectarlo en el frasco de Percoll. Lavar esa jeringa en el Percoll, aspirando y devolviendo el medio. Después de esa mezcla, tendremos en este tubo el Percoll al 100%.
- Aspirar 2 ml y colocar 1 ml en cada uno de los dos tubos de centrifuga.
- Aspirar 5 ml de HAM F-10 MODIFICADO en una jeringa de 5 ml y desconectar la aguja.
- Aspirar 1,8 ml del frasco de PERCOLL 100% con la jeringa de 3 ml y completar para 2 ml, aspirando 0,2 ml de la jeringa de 5 ml conteniendo HAM F-10 MODIFICADO, sin su aguja. Homogenizar la jeringa de 3 ml y distribuir 1 ml para cada tubo de centrífuga, bien lentamente, por la pared de tubo. Este será el Percoll al 80%.
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Seguir de acuerdo con el esquema abajo:
SEMEM |
2 ml de SEMEM |
40% |
1,5 ml de PERCOLL
40% |
60% |
1,0 ml de PERCOLL
60% |
70% |
1,0 ml de PERCOLL
70% |
80% |
1,0 ml de PERCOLL
80% |
90% |
1,0 ml de PERCOLL
90% |
100% |
1,0 ml de PERCOLL
100% |
PREPARACIÓN DE LAS SOLUCIONES DE PERCOLL
100% |
1 ml de DILUIDOR DE PERCOLL + 9 ml de PERCOLL |
90% |
1,8 ml de PERCOLL 100% + 0,2 ml de HAM F-10 MOD. |
80% |
1,6 ml de PERCOLL 100% + 0,4 ml de HAM F-10 MOD. |
70% |
1,4 ml de PERCOLL 100% + 0,6 ml de HAM F-10 MOD. |
60% |
1,2 ml de PERCOLL 100% + 0,8 ml de HAM F-10 MOD. |
40% |
1,2 ml de PERCOLL 100% + 1,8 ml de HAM F-10 MOD. |
PRESENTACIÓN DEL GRADIENTE PERCOLL
05 Frascos deHam F-10 Modificado 20 ml |
Validad: 12 meses |
05 Frascos de Percoll 9 ml |
Validad: 12 meses |
01 Frasco de Diluidor de Percoll 5 ml
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Validad: 03 meses |
Conservação: de 2 à 6ºC.
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