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 MEDIO GLASGOW
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CONSERVACIÓN: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6oC. Si esas condiciones no son mantenidas podrán ser observadas las siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad bajo condiciones normales.
PREPARACIÓN: el MEDIO GLASGOW en polvo es extremadamente higroscópico debiendo ser protegido del medio ambiente. No son recomendadas preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, debido a la posibilidad de formación de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado de agua tridestilada (15-20oC).
2. Agregar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
3. Después que el polvo esté totalmente disuelto, agregue 1,2g de bicarbonato de sódio al 5,6% por litro.
4. Adicione antibióticos u otras sustancias que crea que son necesarias.
5. El pH puede ser obtenido de acuerdo a lo deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N, o gasificando con CO2.
6. Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.
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DEFINICIÓN: es una mezcla de sales enriquecida con aminoácidos, vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular.
ACCIÓN: actúa como una solución nutritiva en cultivo celular.
INDICACIÓN: se destina al cultivo de células humanas y de otros animales. Este medio es distribuido en polvo y en forma líquida. La presentación en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses cuando se conserva bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio en polvo es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo, utilizando en ese caso un mismo lote. El MEDIO GLASGOW es modificado a partir del Medio BME EAGLE por medio de la adición de 10% de Tryptose Phospfate*, el doble de aminoácidos y vitaminas y también 4,5g de glucosa anhidra.
VENTAJAS: probado por lo menos en tres linajes celulares diferentes, además del cultivo de linfocitos. Siempre es determinado su pH y osmolaridad. Cada lote solamente es liberado si se encuentra dentro de los estándares físicos, químicos y biológicos, además de aquellos relativos a al promoción del crecimiento celular.
CARACTERÍSTICAS FÍSICOQUÍMICAS:
- Aspecto : polvo rosa amarillento homogéneo
- Tamaño de las partículas : aproximadamente 20 micrones
- Solubilidad : solución límpida em la concentración de uso (1X)
- pH a 25oC (sin NaHCO3): 6,0 + 0,3
- pH a 25oC (con NaHCO3): 7,6 + 0,3 -Osmolaridad (sin NaHCO3): 260 ± 5%
- Osmolaridad (con NaHCO3): 310 ± 5% |
* Este componente no hace parte de la formulación y debe ser adicionado posteriormente.
COMPOSICIÓN MEDIO GLASGOW
SALES INORGÁNICAS |
mg/L |
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L-fenilalanina |
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CaCl22H2O |
265,00 |
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L-treonina |
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FeNI9H2O |
0,10 |
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L-triptofano |
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MgSO4 |
97,67 |
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L-tirosina |
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KCl |
400,00 |
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L-valina |
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NaHCO3 |
2.750,00 |
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NaCl |
6.400 |
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VITAMINAS |
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NaH2PO4 |
107,80 |
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Cloruro de Colina |
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Ácido Fólico |
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AMINOÁCIDOS |
mg/L |
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Myo-inositol |
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L-arginina |
42,00 |
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Niacinamida |
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L-cistina 2HCl |
31,29 |
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Ácido Pantotécnico |
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L-glutamina |
292,00 |
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Piridoxal |
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L-Histidina HCl.H2O |
21,00 |
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Riboflavina |
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L-isoleucina |
52,40 |
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Tiamina |
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L-leucina |
52,40 |
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L-lisina |
73,10 |
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OTROS COMPONENTES |
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L-metionina |
15,00 |
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glucosa |
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rojo de fenol |
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