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 NUTRIENTE HAM F-10
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CARACTERÍSTICAS FÍSICO-QUÍMICAS:
· Aspecto : polvo amarillo-rosado homogéneo
· Tamaño de las partículas: aproximadamente 20 micrones
· Solubilidad : solución límpida en la concentración de uso (1X)
. pH a 25oC (sin NaHCO3): 6,8 + 0,25
· pH a 25oC (con NaHCO3): 7,5 + 0,25
. Osmolaridad (sin NaHCO3): 252 + 5%
· Osmolaridad (con NaHCO3): 282 + 5%
CONSERVACIÓN: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6oC. Si esas condiciones no son mantenidas, podrán ser observadas lãs siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular en condiciones normales.
PREPARACIÓN: El medio HAM F-12 en polvo es extremadamente higroscópico, debiendo ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, debido a la posibilidad de formación de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado de agua tridestilada (15 - 20oC).
2. Agregar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
3. Después que el polvo este totalmente disuelto, agregue 1,2g de bicarbonato de sodio al 5,6%, por litro.
4. Adicionar antibióticos u otras sustancias que crea que son necesarias.
5. El pH puede ser ajustado conforme deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N, o gasificándolo con CO2.
6. Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.
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DEFINICIÓN: es una mezcla de sales enriquecida con aminoácidos, vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular.
ACCIÓN: actúa como solución nutritiva en cultivo celular.
INDICACIÓN: se destina al cultivo de células humanas y de animales. Este medio es distribuido en polvo y líquido. La presentación en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses, si es conservado bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio en polvo es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo utilizando, en ese caso, un mismo lote. Por su contenido de piruvato de sodio el HAM F-10 es un medio muy usado en reproducción, pero tiene otras diversas aplicaciones porque tiene una serie de nutrientes que facilitan el metabolismo celular.
VENTAJAS: testado en por lo menos tres linajes diferentes, además de cultivo en linfocitos, siendo siempre determinado su pH y osmolaridad. Cada lote solamente es liberado si está dentro de los estándares físicos y biológicos, además de los relativos a la promoción del crecimiento celular.
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COMPOSICIÓN NUTRIENTE HAM F-10
SALES INORGÁNICAS |
mg/L |
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L-Serina |
10,50 |
CaCl2.2H2O |
44,100 |
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L-treonina |
3,57 |
CuSo4.H2O |
0,0025 |
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L-triptófano |
0,80 |
FeSO4.7H2O |
0,834 |
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L-tirosina |
2,61 |
KCl |
285,000 |
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L-valina |
3,50 |
MgCl6H2O |
123,000 |
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mg/L |
NaCl |
7.599.000 |
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0,024 |
NaHCO3 |
1.176,000 |
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0,715 |
Na2HPO4 |
142,040 |
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0.698 |
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1.320 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
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0.541 |
L-alanina |
9,00 |
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0,615 |
L-arginina.HCL |
211,00 |
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0,206 |
L-asparagina.H2O |
15,01 |
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0,376 |
L-ácido aspártico |
13,00 |
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1,000 |
L-cisteína |
35,00 |
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1,360 |
L-ácido glutámico |
14,70 |
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L-glutamina |
146,00 |
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mg/L |
Glicina |
7,58 |
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1.100,00 |
L-histidina.HCl.H2O |
23,00 |
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4,00 |
L-isoleucina |
3.94 |
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0,21 |
L-leucina |
13,00 |
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1,20 |
L-lisina |
36.5 |
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Piruvato de Sodio |
110,00 |
L-metionina |
4,48 |
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0,70 |
L-fenilalanina |
5,00 |
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L-prolina |
34.50 |
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