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 MEDIO 199 (EARLE)
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CARACTERÍSTICAS FÍSICO-QUÍMICAS:
-Aspecto: polvo róseo y homogéneo
-Tamaño de las partículas: aproximadamente 20 micrones
-Solubilidad: solución límpida en la concentração de uso (1x)
-pH a 25oC (sin NaHCO3) : 4,12 + 0,5
-pH a 25oC (con NaHCO3) :7,40 + 0,5
-Osmolaridad (sin NaHCO3) : 250 + 5%
-Osmolaridad (con NaHCO3) : 290 + 5%
CONSERVACIÓN: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6oC. Si esas condiciones no son mantenidas, podrán ser observadas las siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular bajo condiciones normales.
PREPARACIÓN: el MEDIO MEIO 199 en polvo es extremadamente higroscópico y debe ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, debido a la gran posibilidad de formación de precipitados.
1. Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado de agua tridestilada (15 - 20oC).
2. Adicionar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
3. Después que el polvo este disuelto, agregue 2,2g de bicarbonato de sodio al 5,6% por litro.
4. Agregue antibióticos u otras sustancias que crea que sean necesarias.
5. Pode obtenerse el pH de acuerdo a lo deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N o gasificando con CO2.
6. Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.
Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22m, utilizando presión positiva.
PRESENTACIÓN :
Polvo: frascos con polvo para 1, 10 o 50 litros
Líquido: frascos con 100 o 500 ml
CONSERVACIÓN : 2 a 6ºC
VALIDAD : 12 meses |
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DEFINICIÓN: es una mezcla de sales enriquecida con aminoácidos, vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular.
ACCIÓN: actúa como una solución nutritiva en cultivo celular.
INDICACIÓN: se destina al cultivo de células humanas y de otros animales. Este medio es distribuido deshidratado, en polvo o como líquido. La presentación en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses cuando conservado bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja de este medio es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo, utilizando en ese caso un mismo lote. El MEDIO 199, por ser pobre en ácido fólico, es más utilizado para investigación del sitio frágil del cromosoma X, además presenta una infinidad de vitaminas que facilitan el metabolismo celular.
VENTAJAS: probado en por lo menos tres linajes celulares diferentes, siendo siempre determinados su pH y osmolaridad. Cada lote es liberado solo si está dentro de los límites adecuados, además de promover un óptimo crecimiento celular. |
COMPOSICIÓN MEDIO 199
SALES INORGÁNICAS |
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biotina |
0,010 |
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calciferol |
0,100 |
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pantotenato de cálcio |
0,010 |
MgSO47H2O |
200,00 |
cloruro de colina |
0,500 |
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ácido fólico |
0,010 |
C2H3O2Na |
50,00 |
Inositol |
0,050 |
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6.800,00 |
Menadione |
0,010 |
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2.200,00 |
ácido nicotínico |
0,025 |
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125,00 |
niacinamida |
0,025 |
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ácido p-aminobenzóico |
0,050 |
AMINOÁCIDOS |
mg/L |
piridoxal.HCL |
0,025 |
L-alanina |
25,00 |
piridoxina.HCL |
0,025 |
L-arginina.HCL |
70,00 |
Riboflavina |
0,010 |
L-ácido aspártico |
30,00 |
Tiamina.HCL |
0,010 |
L-cisteína.HCL.H2O |
0,11 |
acetato de retinol |
0,140 |
L-cistina |
26,00 |
fosfato de tocoferol Na |
0.01 |
L-ácido glutâmico |
75,00 |
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L-glutamina |
100,00 |
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mg/L |
glicina |
50,00 |
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10,00 |
L-histidina.HCL.H2O |
21,88 |
adenosina trifosfato -2 Na
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1,00 |
hidroxiprolina |
10,00 |
adenosina monofosfato -Na
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0,20 |
L-isoleucina |
20,00 |
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0,20 |
L-lisina.HCL |
70,00 |
|
0,50 |
L-fenilalanina |
25,00 |
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1000.00 |
L-leucina |
60,00 |
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L-metionina |
15,00 |
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L-prolina |
40,00 |
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L-serina |
25,00 |
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L-treonina |
30,00 |
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L-triptofano |
10,00 |
Xantina Na |
0.344 |
L-tirosina |
57,70 |
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L-valina |
25,00 |
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VITAMINAS |
mg/L |
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ácido ascórbico |
0,050 |
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