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MEIO RPMI 1640  








CARACTERÍSTICA FISIO-QUÍMICAS:

· Aspecto : Pó róseo e homogêneo
· Tamanho das Particulas : aproximadamente 20 microns
· Solubilidade : solução límpida na concentração de uso (1x)
· pH a 25°C (Sem NaHCO3) : 8,0 + 0,5
· pH a 25°C (ComNaHCO3) : 8,1 + 0,5
· Osmolaridade (sem NaHCO3) : 246 + 5%
· Osmolaridade (com NaHCO3) : 290 + 5%

CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou preparado líquido entre 2 à 6°C. Se essas condições não forem mantidas, poderão ser observadas alterações do tipo:

1. Mudança de Cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade de manter a integridade celular sob condições normais.

PREPARAÇÃO: O MEIO RPMI 1640 em pó é extremamente higroscópico, devendo ser protegido do meio ambiente. Não são recomendadas preparações de concentrações maiores que aquelas especificadas, devido a grande possibilidade de formação de precipitados.
1.) Medir aproximadamente 90% do volume a ser preparado de água tridestilada (15 - 20°C).
2.) Adicionar lentamente o pó sob agitação constante. NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3.) Depois que o pó estiver totalmente dissolvido, acrescentar por litro 2,0g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4.) Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que julgar necessário.
5.) Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado, utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda, gaseificando-se com CO2.
6.) Completar o volume com água tridestilada e esterilizar por filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão positiva.

APRESENTAÇÃO: PÓ - Frascos com pó
para preparo de 1, 10 e 50 litros.
LÍQUIDO - Frasco com 100 ml.
CONSERVAÇÃO: 2 à 6°C
VALIDADE: 12 meses



DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais enriquecidos com aminoácidos, vitaminas e outros componentes essenciais para o crescimento celular.


AÇÃO: Age como uma solução nutritiva em cultivo celular.


INDIÇAÇÃO: Destina-se à cultura de células humanas e de outros animais. Este meio é fornecido na forma desidratada, em pó ou líquido. Na forma de pó ele tem a vantagem de se manter estável por mais 24 meses se conservado bem fechado e em geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo, utilizando nesse caso um mesmo lote. O MEIO RPMI 1640, por não ter timidina na sua composição, é muito utilizado para obter a sincronização da divisão celular.

VANTAGENS: Testado em pelo menos três linhagens diferentes, sendo sempre determinado o seu pH e osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo crescimento celular.


COMPOSIÇÃO MEIO RPMI 1640

SAIS INORGÂNICOS mg/L   L-triptofano 5,00
Ca(NO3)2.4H2O 100,00   L-prolina 20,00
KCL 400,00   L-tirosina 28,00
MgSO4.7H2O 100,00   L-serina 30,00
NaCl 6.000,00   L-valina 20,00
NaHCO3 2.000,00   L-treonina 20,00
Na2HPO4 800,00      
      VITAMINAS mg/L
AMINOÁCIDOS mg/L   biotina 0,200
L-arginina.HCL 200,00   pantotenato de cálcio 0,250
L-asparigina.H2O 50,00   cloreto de colina 3,000
L-ácido aspártico 20,00   ácido fólico 1,000
L-cistina 50,00   inositol 35,000
L-ácidoglutâmico 20,00   nicotinamida 1,000
L-glutamina 300,00   ácido p-aminobenzóico 1,000
glicina 10,00   piridoxina.HCL 1,000
L-histidina.HCL.H2O 15,00   riboflavina 0,200
L-hidroxiprolina 20,00   tiamina.HCL 1,000
L-isoleucina 50,00   vitaminaB12 0,005
L-leucina 50,00      
L-lisina.HCL 40,00   OUTROS COMPONENTES mg/L
L-metionina 15,00   glicose 2.000,00
L-fenilalanina 15,00   glutatione 1,00
      vermelho de fenol 5,00


IMPORTANTE:
Todos os Meios Líquidos VITROCELL prontos para uso contém antibiótico/antimicótico
Sulfato de Gentamicina: 50 mg/L
Anfotericina B: 2 mg/L