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MEDIO LEIBOWITZ L-15
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CARACTERÍSTICAS FISIO-QUÍMICAS
Aspecto: polvo róseo y homogéneo
Tamaño de las partículas: aproximadamente 20 micras
Solubilidad: solución límpida en la concentración de uso (1X)
pH a 25ºC (Sin NaHCO3): 8,1 ± 0,30
Osmolaridad: 320+5%
Conservación: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6ºC. Si esas condiciones no son mantenidas podrán ser observadas las siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular en condiciones normales.
Preparación: el MEDIO LEIBOVITZ L-15 en polvo es extremadamente higroscópico, debiendo ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, por la gran posibilidad de formación de precipitados.
Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado y agua tridestilada (15 - 20ºC).
Adicionar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
Adicionar antibióticos u otras sustancias que crea que son necesarias.
Se puede manipular el pH conforme lo deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N, o aún, gasificándolo con CO2.
Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22µ, utilizando presión positiva
PRESENTACIÓN :
Polvo: frascos con polvo para 1, 10 o 50 litros
Líquido: frascos con 100 o 500 ml
CONSERVACIÓN : 2 a 6ºC
VALIDAD : 12 meses
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Definición: es una mezcla de sales enriquecida con una cantidad mucho mayor de aminoácidos. En comparación con los otros medios posee vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular. Fue desarrollado para uso en estufa de CO2, pues su formula no contiene bicarbonato como tampón.
Acción: es una solución altamente nutritiva para cultivo celular y, dependiendo del uso, no necesita estufa de CO2 para el mantenimiento del pH.
Indicación: se destina al cultivo de células humanas, de otros animales, células de linaje (HEp-2) y células de insectos. Este medio es distribuido en polvo. En la forma en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses si es conservado bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio en polvo es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo, utilizando en ese caso un mismo lote.
Ventajas: por ser tamponado con base en sales, en las bases libres de aminoácidos y galactosa, en vez de glucosa, mantiene un buen autocontrol del pH fisiológico. Testado en por lo menos tres linajes celulares diferentes, siendo siempre determinado su pH y osmolaridad. Cada lote es liberado solamente si está dentro de los límites adecuados. Adicionalmente, promueve un óptimo crecimiento celular.
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COMPOSICIÓN MEDIO LEIBOWITZ L-15
SALES INORGÁNICAS |
mg/L |
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AMINIÁCIDOS |
mg/L |
CaCl22H2O |
185,00 |
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L-alanina |
225,00 |
KCL |
400,00 |
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L-arginina (base libre) |
500,00 |
KH2PO4 |
60,00 |
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L-asparigina.H2O |
125,00 |
MgCl26H2O |
200,00 |
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L-cisteina (base libre) |
120,00 |
MgSO4 |
97,67 |
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L-glutamina |
300,00 |
MgSO47H2O |
------ |
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glicina |
200,00 |
NaCl |
8.000,00 |
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L-histidina (base libre) |
250,00 |
Na2HPO4 |
190,12 |
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L-isoleucina |
125,00 |
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L-leucina |
125,00 |
VITAMINAS |
mg/L |
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L-lisina |
75,00 |
Pantotenato de Calcio |
1,00 |
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L-metionina |
75,00 |
Cloruro de Colina |
1,00 |
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L-fenilalanina |
125,00 |
Ácido Fólico |
1,00 |
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L-serina |
100,00 |
Inositol |
2,00 |
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L-treonina |
300,00 |
Piridoxal.HCL |
1,00 |
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L-triptófano |
20,00 |
Nicotinamida |
1,00 |
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L-tirosina |
100,00 |
Riboflavina |
0,10 |
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L-valina |
200,00 |
Tiamina |
1,00 |
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OTROS COMPONENTES |
mg/L |
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D(+) galactose |
900,00 |
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rojo de fenol |
10,00 |
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piruvato de sodio |
550,00 |
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