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MEDIO LEIBOWITZ L-15

 








CARACTERÍSTICAS FISIO-QUÍMICAS

Aspecto: polvo róseo y homogéneo
Tamaño de las partículas: aproximadamente 20 micras
Solubilidad: solución límpida en la concentración de uso (1X)
pH a 25ºC (Sin NaHCO3): 8,1 ± 0,30
Osmolaridad: 320+5%

Conservación: almacenar el medio en polvo o preparado líquido entre 2 y 6ºC. Si esas condiciones no son mantenidas podrán ser observadas las siguientes alteraciones:
1. Cambios de color
2. Granulaciones
3. Insolubilidad
4. Alteración de pH
5. Incapacidad de mantener la integridad celular en condiciones normales.

Preparación: el MEDIO LEIBOVITZ L-15 en polvo es extremadamente higroscópico, debiendo ser protegido del medio ambiente. No se recomiendan preparaciones de concentraciones mayores a las especificadas, por la gran posibilidad de formación de precipitados.

Medir aproximadamente 90% del volumen a ser preparado y agua tridestilada (15 - 20ºC).
Adicionar lentamente el polvo agitando constantemente. NO CALIENTE EL AGUA.
Adicionar antibióticos u otras sustancias que crea que son necesarias.
Se puede manipular el pH conforme lo deseado, utilizando HCl 1N o NaOH 0,1N, o aún, gasificándolo con CO2.
Completar el volumen con agua tridestilada y esterilizar por filtración en membranas de 0,22µ, utilizando presión positiva 

PRESENTACIÓN :
Polvo: frascos con polvo para 1, 10 o 50 litros
Líquido: frascos con 100 o 500 ml
CONSERVACIÓN : 2 a 6ºC
VALIDAD : 12 meses

 

Definición: es una mezcla de sales enriquecida con una cantidad mucho mayor de aminoácidos. En comparación con los otros medios posee vitaminas y otros componentes esenciales para el crecimiento celular. Fue desarrollado para uso en estufa de CO2, pues su formula no contiene bicarbonato como tampón.

Acción: es una solución altamente nutritiva para cultivo celular y, dependiendo del uso, no necesita estufa de CO2 para el mantenimiento del pH.

Indicación: se destina al cultivo de células humanas, de otros animales, células de linaje (HEp-2) y células de insectos. Este medio es distribuido en polvo. En la forma en polvo tiene la ventaja de mantenerse estable por más de 24 meses si es conservado bien cerrado y refrigerado. Otra gran ventaja del medio en polvo es la constancia de resultados cuando se programan cultivos celulares a largo plazo, utilizando en ese caso un mismo lote.

 

Ventajas: por ser tamponado con base en sales, en las bases libres de aminoácidos y galactosa, en vez de glucosa, mantiene un buen autocontrol del pH fisiológico. Testado en por lo menos tres linajes celulares diferentes, siendo siempre determinado su pH y osmolaridad. Cada lote es liberado solamente si está dentro de los límites adecuados. Adicionalmente, promueve un óptimo crecimiento celular.

COMPOSICIÓN MEDIO LEIBOWITZ L-15

SALES INORGÁNICAS
mg/L
 
AMINIÁCIDOS
mg/L
CaCl22H2O
185,00
 
L-alanina
225,00
KCL
400,00
 
L-arginina (base libre)
500,00
KH2PO4
60,00
 
L-asparigina.H2O
125,00
MgCl26H2O
200,00
 
L-cisteina (base libre)
120,00
MgSO4
97,67
 
L-glutamina
300,00
MgSO47H2O
------
 
glicina
200,00
NaCl
8.000,00
 
L-histidina (base libre)
250,00
Na2HPO4
190,12
 
L-isoleucina
125,00
 
L-leucina
125,00
VITAMINAS
mg/L
 
L-lisina
75,00
Pantotenato de Calcio
1,00
 
L-metionina
75,00
Cloruro de Colina
1,00
 
L-fenilalanina
125,00
Ácido Fólico
1,00
 
L-serina
100,00
Inositol
2,00
 
L-treonina
300,00
Piridoxal.HCL
1,00
 
L-triptófano
20,00
Nicotinamida
1,00
 
L-tirosina
100,00
Riboflavina
0,10
 
L-valina
200,00
Tiamina
1,00
 
 
OTROS COMPONENTES
mg/L
 
D(+) galactose
900,00
 
rojo de fenol
10,00
 
piruvato de sodio
550,00